2025-06-04 10:01:44
目前有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,且都可以用于體內和體外研究。**種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個(gè)神經(jīng)元中。此方法方便實(shí)驗者控制單個(gè)神經(jīng)元內的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負載神經(jīng)元,觀(guān)察對象為一群神經(jīng)元。盡管此方法可能導致一些膠質(zhì)細胞也被指示劑所標記,但提高了整體神經(jīng)元的標記百分比,使研究者得以觀(guān)察到一群神經(jīng)元內動(dòng)作電位相關(guān)性的活動(dòng)。第三種也較為常用,通過(guò)病毒轉染的方式使其基因編碼鈣離子指示劑。(A)單細胞注射法;(B)networkloading法;(C)通過(guò)病毒轉染使其基因編碼鈣離子指示劑(expressionofgeneticallyencodedcalciumindicators,GECI)清醒動(dòng)物腦功能鈣成像的微型顯微鏡的研究在不斷實(shí)踐中。上海新型鈣成像銷(xiāo)售
可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光探針與紫外光激發(fā)探針相比,可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+探針具有更強的染料吸收性能,對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,能夠降低對活細胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,且無(wú)光譜偏移。常使用的可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,Fluo-4,Rhod-2等,同時(shí)他們也都是非比率型指示劑。Fluo-3是常用的可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一,是典型的的單波長(cháng)指示劑,比較大激發(fā)波長(cháng)為506nm,比較大發(fā)射波長(cháng)為526nm。它與Ca2+結合之前幾乎無(wú)熒光,結合后熒光會(huì )增加60至100倍,從而避免了細胞自身的熒光干擾。實(shí)際檢測時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(cháng)為488nm左右,發(fā)射波長(cháng)為525~530nm。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細胞儀中。它還有一個(gè)升級版本Fluo-4,在相同Ca2+濃度下信號更強。上海超微顯微鈣成像什么價(jià)格功能性多神經(jīng)元鈣成像是一種通過(guò)記錄神經(jīng)元內Ca2+信號變化,監測大量神經(jīng)元動(dòng)作電位的光學(xué)記錄技術(shù)。
nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統是可以在自由活動(dòng)的動(dòng)物上進(jìn)行大范圍的動(dòng)態(tài)熒光成像的設備。通過(guò)nVist,您可以視覺(jué)化細胞活動(dòng),同步行為學(xué),以及長(cháng)期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動(dòng)。nVista被應用于全球的研究機構中,產(chǎn)生了影響力的大數據庫。主要特征:利用GCamp鈣離子探針進(jìn)行成像功能完整的數據采集軟件,實(shí)現對焦,調焦,行為同步化單細胞分辨率下,可同時(shí)捕獲成百上千神經(jīng)元活動(dòng)長(cháng)時(shí)間追蹤細胞,追蹤時(shí)間可長(cháng)達數月電子對焦,保證視野范圍的恒定自由動(dòng)物行為學(xué):可運用標準行為學(xué)測量方法,行為操作箱,迷宮,曠場(chǎng)等可進(jìn)行皮層,深部核團,以及腦干,中腦等區域的成像記錄動(dòng)物無(wú)需進(jìn)行適應性訓練鈣離子成像+自由活動(dòng)行為學(xué)1.錨定特殊細胞類(lèi)型,例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率,可以分析細胞在空間內的mapping和編碼信息3.動(dòng)物可在大范圍的曠場(chǎng)內自由活動(dòng)4.長(cháng)時(shí)程追蹤同一細胞的放電規律變化:用于學(xué)習,記憶,藥物成癮等研究。5.可對腦內的深部核團進(jìn)行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統成像效果好。神經(jīng)元超微鈣成像系統技術(shù)參數專(zhuān)業(yè)的數據采集軟件Inscopix數據采集軟件可記錄成百上千個(gè)神經(jīng)元細胞。電子調焦功能,可通過(guò)軟件實(shí)現物理調焦。
鈣成像技術(shù)是一種監測組織內鈣離子濃度的方法,通過(guò)使用鈣離子指示劑,科學(xué)家可以觀(guān)察神經(jīng)信號在神經(jīng)網(wǎng)絡(luò )中的傳遞過(guò)程,并了解神經(jīng)元活動(dòng)與內部鈣離子濃度的關(guān)系。在靜息狀態(tài)下,大部分神經(jīng)元的胞內鈣離子濃度為50-100nM,而當神經(jīng)元活動(dòng)的時(shí)候,胞內鈣離子濃度能上升10-100倍,增加的鈣離子對于含有神經(jīng)遞質(zhì)的突觸囊泡的胞吐釋放過(guò)程必不可少。鈣成像是一種生物醫學(xué)技術(shù),主要用于觀(guān)察和記錄細胞內鈣離子濃度的變化。鈣離子是細胞內重要的信號分子,其濃度的改變可以影響細胞的生理功能和病理狀態(tài)。因此,鈣成像技術(shù)對于研究細胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、心血管醫學(xué)等領(lǐng)域具有重要意義。鈣信號發(fā)揮著(zhù)高度特異性的功能。
可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光探針:與紫外光激發(fā)探針相比,可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+探針具有更強的染料吸收性能,對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,能夠降低對活細胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,且無(wú)光譜偏移。較常使用的可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,Fluo-4,Rhod-2等,同時(shí)他們也都是非比率型指示劑。Fluo-3是較常用的可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一,是典型的的單波長(cháng)指示劑,比較大激發(fā)波長(cháng)為506nm,比較大發(fā)射波長(cháng)為526nm。它與Ca2+結合之前幾乎無(wú)熒光,結合后熒光會(huì )增加60至100倍,從而避免了細胞自身的熒光干擾。實(shí)際檢測時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(cháng)為488nm左右,發(fā)射波長(cháng)為525~530nm(圖3)。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細胞儀中。它還有一個(gè)升級版本Fluo-4,在相同Ca2+濃度下信號更強。小鼠頭戴式微型顯微鏡為后續清醒動(dòng)物腦功能鈣成像研究提供了一套可靠的顯微成像系統。上海無(wú)障礙鈣成像銷(xiāo)售
近年來(lái)出現了通過(guò)植入性的顯微鏡或透鏡進(jìn)行活動(dòng)動(dòng)物鈣成像的技術(shù)。上海新型鈣成像銷(xiāo)售
想要對鈣離子的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行有效的檢測,鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結合鈣離子前幾乎無(wú)熒光,與鈣離子結合后,熒光強度xianzhu增強。利用這一原理,可以通過(guò)指示劑的信號強弱來(lái)觀(guān)察細胞內鈣離子濃度水平的變化。根據激發(fā)光波長(cháng)范圍,鈣離子指示劑可以分為可見(jiàn)光激發(fā)和紫外光激發(fā),而根據其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見(jiàn)的鈣離子指示劑有以下幾種:紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針、可見(jiàn)光激發(fā)Ca2+熒光探針、轉基因Ca2+指示劑。上海新型鈣成像銷(xiāo)售