2025-04-05 02:04:17
1996年GRaposo等發(fā)現類(lèi)似于B淋巴細胞的免疫細胞也會(huì )分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應CD4+細胞的抗一些病癥反應。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現細胞之間可以通過(guò)外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著(zhù)有關(guān)外泌體研究越來(lái)越多,研究者發(fā)現它普遍參與了機體免疫應答、抗原呈遞、細胞分化、一些病癥生長(cháng)于侵襲等各種生物過(guò)程中。目前的主流觀(guān)點(diǎn)認為,外泌體的產(chǎn)生過(guò)程為:細胞膜內陷,形成內體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見(jiàn)于1981年,EGTrams等在體外培養的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現了有膜結構的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當時(shí)推測為細胞排泄廢物的一種方式。離心除去細胞器,留取上清。重慶外泌體提取試劑單價(jià)
外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過(guò)色譜柱,首先被流動(dòng)相洗脫出來(lái);小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì),利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進(jìn)行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡(jiǎn)單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。武漢外泌體提取試劑哪家好外泌體提?。菏褂每贵w包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體。
外泌體的提取、分離方法:梯度密度離心法。研究發(fā)現,外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間,因此,可以采用密度梯度離心法來(lái)分離外泌體。該方法是將超速離心結合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結合,原理是先除去非囊泡物質(zhì),再通過(guò)梯度密度濃縮提取外泌體,該方法可以得到相對較為純凈的外泌體。傳統的梯度密度方法通常需要離心16h,但是2012年,研究者[15]使用了62~90h才分離出某些確切囊泡,因此,該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時(shí)間不充足,污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層,特別是這個(gè)密度范圍又比較寬。
外泌體因諾貝爾醫學(xué)獎而被眾人知曉,也因其作為生命信息傳遞者,在體液中普遍存在及易獲得性等特點(diǎn)被譽(yù)為液體活檢"新貴",成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點(diǎn),尤其是在一些病癥研究領(lǐng)域[。外泌體作為細胞間通信載體的作用現在已被普遍接受。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA,RNA,蛋白質(zhì)和其它分析物,研究表明,外泌體中的運轉RNA和蛋白質(zhì)與一些病癥的生長(cháng)密切相關(guān),有望作為診斷標志物。研究發(fā)現Vps4A是一個(gè)外泌體的重要調控因子,與肝病的發(fā)生有著(zhù)密切的關(guān)系,Vps4A基因的表達下調肝病的發(fā)生及轉移相關(guān)。通過(guò)microRNA高通量測序發(fā)現Vps4A基因能導致外泌體分泌肝病相關(guān)的重要microRNA,與肝病的發(fā)生密切相關(guān)。外泌體提?。和ㄟ^(guò)色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,這可能會(huì )改變囊泡的結構。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時(shí),量少。、對外泌體的研究興趣日益增長(cháng),無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng )診斷的開(kāi)發(fā)。武漢外泌體提取試劑哪家好
由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì)。重慶外泌體提取試劑單價(jià)
外泌體與肺病預后:在當代精細**的大趨勢下,外泌體的發(fā)現和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現和早期診療提供可靠依據。根據一些病癥來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉移過(guò)程中的作用及相關(guān)機制的研究,臨床**人員可以針對不同的患者制定較合適的治病方案,以達到改善肺病患者生存率,延長(cháng)肺病患者生存時(shí)間的目的。但是,針對外泌體的研究還存在諸多的問(wèn)題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機制及信號通路等??偠灾?,外泌體的研究有著(zhù)廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應用于肺病臨床診斷和治病的有效措施,造福更多的患者。重慶外泌體提取試劑單價(jià)