2025-06-08 03:04:42
抗體藥物研發(fā)客戶(hù)提供小眾創(chuàng )新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無(wú)動(dòng)物源培養基質(zhì),轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù),支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無(wú)縫轉化;以及提供藥物開(kāi)發(fā)和探索的抗體文庫定制和商業(yè)授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業(yè)化生產(chǎn),以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術(shù),分享研發(fā)工具進(jìn)步帶來(lái)的技術(shù)紅利,終為細胞、基因產(chǎn)業(yè)以及再生醫學(xué)行業(yè)等乃至整個(gè)生命科學(xué)行業(yè)賦能!若想咨詢(xún)更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)信息,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!有人知道PEI轉染試劑的價(jià)格么?上海MSC培養PEI轉染試劑
產(chǎn)品簡(jiǎn)介T(mén)ransporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線(xiàn)性聚乙烯亞胺(PEI轉染試劑)溶液,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES無(wú)菌過(guò)濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物,這些復合物很容易通過(guò)內吞作用進(jìn)入細胞,并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,有效提高轉染效率。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲(chóng)(SF9、SF21)等真核細胞系,可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉染。Transporter5可節省試劑準備時(shí)間,加快項目進(jìn)度。經(jīng)過(guò)嚴格的性能檢測,確保品質(zhì),在新藥研發(fā)過(guò)程中是一款快速、重復性好、可用于批量產(chǎn)的轉染試劑。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉染試劑,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!上海MSC培養PEI轉染試劑PEI轉染試劑在使用時(shí)出現沉淀的原因是什么?
1.對于某些類(lèi)型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著(zhù)提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時(shí)細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無(wú)蛋白培養基則需測試與線(xiàn)性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。若有更多關(guān)于Polysciences 轉染試劑相關(guān)技術(shù)問(wèn)題,歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。歡迎關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio
穩定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會(huì )稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí),去除生長(cháng)培養基,替換成無(wú)血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio PEI轉染試劑的主要分子量是多少?
瞬時(shí)轉染方法1.接種細胞:轉染前,用膠原酶消化細胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,總體積如表1所示,每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí),去除生長(cháng)培養基,替換成無(wú)血清培養基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI轉染試劑相關(guān)內容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物!線(xiàn)性的和分支的PEI轉染試劑哪個(gè)好?上海Kyfora Bio by PolysciencesPEI轉染試劑
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